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科捷教您根据色谱图的变化判断液相色谱仪器故障
作者:  浏览量:528  发布时间:2019-03-01 09:55:10

米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪价格配置

一、米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪价格配置

稻米作为人们生活日常中主要的粮食之一,在我国的产量是对高的,是一种一年生草本植物,性喜温湿,中国南方俗称其为“稻谷”或“谷子”,脱壳的粮食是大米,被脱掉的壳是米糠,是由外果皮、中果皮、交联层、糊粉层以及种皮组成,约占整个稻米的5.5%~10%。国内外的研究结果和资料表明,米糠中富含各种营养素和生理活性物质。现在美国等发达国家已经有食用米糠问世,中国也有类似产品被发明,即应用现代食品加工精准碾制技术将米糠中的不益食物质(稻壳、果皮、种皮、灰尘、微生物等)与益食营养物质(胚、糊粉层等外层胚乳)在洁净的生产车间里进行精准碾磨分离,此分离技术可将米糠分级为饲料级米糠和食品级米糠两部分,其中食品级米糠约占米糠总重量的80%,营养的90%以上。因为食品级米糠虽然只占稻谷重量的6%,且占稻谷营养的约60%,是大米碾白过程中的碾下物,所以其也被人们称为“米珍”或是“米粕”。米糠含蛋白质12%~16%、脂肪14%~23%,富含B族、E族维生素、矿物质和膳食纤维,随着大豆及其产物的价格不断上涨,以及米糠的稳定化技术的不断革新,富含多种营养成分和功能因子的米糠作为食品配料在食品工业中的潜在用途可能大大增加,发酵食品作为传统食品领域的重要部分,由于其特有的营养、功能和口感,一直为很多人所喜爱。安全、良好的微生物是发酵食品的基础。红曲、木耳等一些药食同源真菌,为人们所食用了几千年,其保健功能也得到了公认。利用这些真菌的功能特性结合米糠营养,利用生物发酵技术,开发新型功能性食品,以实现米糠作为食品的新突破,可能成为另一条米糠的潜在利用途径。米糠本身作为一种良好的食品新资源,其发酵过程中各成分的变化如何,发酵后性质变化如何,还未有报道。由于脂肪酸是米糠的主要成分,其组分也是米糠的典型标志物,因此,本文从米糠脂肪酸入手,以药食同源的红曲、木耳为菌种,利用气相色谱仪建立对米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析研究,以测定米糠发酵过程中各种脂肪酸的组分及含量的变化情况,为深入研究和开发米糠奠定基础。 实验表明,此米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪非常适用,能快速、高效、准确的完成实验分析。值得推荐使用!


二、仪器与材料准备

1、材料

新鲜米糠(购与超市,取回后放于-18℃冰箱冻存。)

菌种:红曲M180,木耳A900(于4℃冰箱保存)。

土豆:购于超市。


2、试剂准备

甲醇、氢氧化钾、浓硫酸、葡萄糖等分析纯试剂;

正己烷:HPLC级;

谷物脂肪酸甲酯混合标准品(10mg/mL)。


3、仪器准备

米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪GC6891N,隔水式恒温培养箱,微型旋涡混合仪,恒温调速摇瓶柜,立式压力蒸汽灭菌锅,生物洁净工作台,水浴锅。

  

三、气相色谱仪对米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析步骤

1、样前处理

粗脂肪:按GB/T5009.6—2003方法进行;

淀粉:按GB/T5009.9—2003方法进行;

米糠成分检测粗蛋白:按GB/T5009.5—2003方法进行;

灰分:按GB/T5009.4—2003方法进行;

水分:按GB/T5009.3—2003方法进行。


2、土豆斜面培养基配制

将土豆洗净去皮,称取200g切成小块,放入烧杯中,加水1000mL,煮沸30min,过滤。向滤液中加入20g琼脂条,加热搅匀,待全部融化后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀。补水至1000mL,再次搅拌均匀。趁热分装到试管中,封口。121℃高压灭菌15min。1.2.2.2米糠液体培养基取纯米糠装于三角瓶中,以1:9(w:v)的比例加入纯净水,封口摇匀。121℃高压灭菌15min。


3、菌株培养

试管斜面培养接菌种于土豆斜面培养基上,30℃恒温培养至菌种生长旺盛期。种子摇瓶培养分别接1cm2红曲、木耳斜面培养基于已灭菌的装有100mL米糠液体培养基的250mL三角瓶中,置于30℃、200r/min的控温摇床中培养72h。液体摇瓶培养以10%的接种量分别接红曲、木耳种子培养液于装有200mL米糠液体培养基的500mL三角瓶中,置于30℃、200r/min的控温摇床中培养4~7d。


4、样品制备

从种子培养液接入米糠液体培养基开始,每天定时分别从培养基中取样5mL,储存在-18℃冰箱中,待用。室温下,取15mL带盖耐热试管,加入0.7mL用水配成的10mol/L的KOH、5.3mL甲醇,同时取1.0g样品加入其中。试管在55℃水浴1.5h,每20min拿出来强烈振荡5s,使样品更好的均匀的水解。取出试管,冷水降至室温。加入0.58mL用水配成的12mol/L的H2SO4。倒转混匀试管内溶液,再在55℃水浴1.5h,每20min拿出来强烈振荡5s。脂肪酸甲酯化结束后,冷水降至室温。加入3mL正己烷,旋涡混合5min。离心5min,将含有脂肪酸甲酯的正己烷层储存在气相分析瓶中,储存在-18℃冰箱中,待用。


5、气相色谱分析条件

GC6891N气相色谱仪,色谱柱为CBP-20毛细管柱(50m×0.25mm×0.25μm),载气:N2,流速30mL/min,进样口温度280℃,柱子初始温度180℃,以6℃/min的速度升至240℃,保持40min;氢火焰离子化检测器(FID),温度280℃。空气流速400mL/min,氢气流速47mL/min。


四、结果讨论 米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪价格配置

1、米糠成分分析

气相色谱仪

米糠是一种营养十分丰富的生物资源,富含蛋白质、脂肪和碳水化合物。米糠基本成分测定见表1,测定结果与其他报道基本相同,略有一些差异,这可能与米糠的稻谷品种、生长条件和碾米工艺不同有关。米糠富含微生物生长的营养物质,可作为一种优良的培养基,适于不同微生物生长所需。经过实验证明,红曲和木耳在以米糠作为单一营养来源培养基上生长良好。



2、谷物脂肪酸甲酯混合标准品气相分析

经气相GC6891N气相色谱仪分析,谷物脂肪酸甲酯混合标准品测定结果见图1,其各种脂肪酸的具体含量如表2所示。

气相色谱仪

气相色谱仪


3、红曲发酵米糠脂肪酸气相分析

在红曲发酵米糠过程中,随发酵时间增加,液体培养基开始呈现黏稠的粥状,并随时间增加越来越稠,颜色变成红紫色。取红曲发酵的米糠样品,甲酯化处理,经GC分析,其检测结果见图2和表3。

图片4


由图2和表3可以看出,各种脂肪酸含量随发酵时间的延长而降低。经分析得出,发酵过程中脂肪酸的含量由Z初的200.75mg/g下降至68.35mg/g,其中饱和脂肪酸由39.97mg/g下降至11.01mg/g,不饱和脂肪酸由160.78mg/g下降至57.25mg/g,米糠不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例由原来的80.09%上升至83.76%。由此可以看出,在红曲发酵过程中,不饱和脂肪酸占总脂肪酸的百分含量没有得到明显提高,而脂肪总量快速下降。

图片5


4、木耳发酵米糠脂肪酸气相分析

在木耳发酵米糠过程中,伴随发酵时间延长,液体培养基开始呈现小米粥状,个别出现白色菌丝体。取木耳发酵的米糠样品,甲酯化处理,经GC分析,检测结果见图3和表4。

气相色谱仪

气相色谱仪


由图3和表4可以看出,各种脂肪酸含量同样随发酵时间的延长而降低,菌种对脂肪酸的消耗和酯酶的分解作用大于脂肪酶的合成作用。经分析得出,发酵过程中脂肪酸的含量由初始的200.75mg/g下降至79.95mg/g,其中饱和脂肪酸由39.97mg/g下降至15.32mg/g,不饱和脂肪酸由160.78mg/g下降至64.64mg/g,米糠不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例由原来的80.09%上升至80.84%。由此可以看出,同样在木耳发酵过程中,不饱和脂肪酸占总脂肪酸的百分含量也没有得到明显提高,脂肪酸含量在快速降低。但由于木耳发酵时间比红曲长,因此,在脂肪酸的利用上,木耳比红曲利用效率低。可能由于生物总量不如红曲增长迅速,或者两者对米糠中不同营养物质优先利用程度不同。


五、气相色谱仪对米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析结果

米糠液体发酵过程中,红曲M180和木耳A900均能有效利用脂肪酸,但对各种脂肪酸的消耗情况不同,加上微生物自身也能合成一些脂肪酸,从而通过发酵改变了米糠脂肪酸的组分和含量。由以上研究可知,随着发酵时间的增加,不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例有所增加,但是效果并不明显,因此,米糠在发酵过程中,并没有对一些功能性多不饱和脂肪酸起到提高或累积作用,没有达到富集目的。对米糠脂肪酸的分解与利用,红曲效果较好,可能源于红曲能产生孢子,生物量高,而黑木耳在发酵过程中,不产生孢子,生物量较低,因此,利用红曲可快速有效地降低米糠中脂肪含量,可作为一种抑制米糠酸败的潜在途径。下一步的研究内容是红曲M180和木耳A900的脂肪酶活特性,以及在其他能量物质(糖类、蛋白质等)共存前提下,如何进行能量优先利用,以及自身脂肪酸的合成情况。


六、米糠发酵过程中脂肪酸组分测定分析气相色谱仪价格配置如下:

产品名称 

规格型号 

数量 

产地 

价格 

气相色谱仪 

GC6891N型气相色谱仪

1 

江苏 

欢迎来电咨询 

培养箱 

隔水式恒温培养箱 

1 

江苏 

微型旋涡混合仪 

微型旋涡混合仪 

1 

江苏 

恒温调速摇瓶柜 

恒温调速摇瓶柜

1 

国产 

灭菌锅

立式压力蒸汽灭菌锅 

 

1 

江苏 

生物洁净工作台

生物洁净工作台

1 

江苏  

水浴锅

水浴锅

1

江苏

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