联系科捷
HOTLINE
全国统一免费服务热线
139-5165-7500
地址:南京市浦口区万寿路15号南工大产业园E1五楼
电话:139-5165-7500
传真:025-83738955
E-mail:740663512@qq.com
微信售后服务二维码

一、概论
本文讲述的是利用气相色谱仪对饲料中三聚氰胺的测定方法,适用于配合饲料,预混料、植物性蛋白粉、浓缩饲料、饲料添加剂、宠物饲料中三聚氰胺的测定,气相色谱质谱法分别为2.0mg/kg和0.05mg/kg,高效液相色谱的Z低检测浓度分别为0.5mg/kg。
二、方法提要
试样中的三聚氰胺用1%三氯乙酸提取,用阳离子交换柱净化,用BSTFA衍生化,用气相色谱-质谱进行定性和定量分析。
三、试剂和材料准备
衍生化试剂:N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)
仪器准备:科捷气相色谱仪
二、分析步骤
1、植物蛋白和饲料中三聚氰胺的提取
称取5.0g样品,准确加入48ml1%的三氯乙酸溶液,加入2mL饱和醋酸铅溶液。摇匀,超声提取20min。取提取液约30mL转入离心管,在10000rpm离心机上离心5min。
2、宠物饲料中三聚氰胺的提取
称取5.0g样品,在索式提取器中用**回流6h去除脂肪。脱脂残渣准确加入48ml1%的三氯乙酸溶液,加入2mL饱和醋酸铅溶液。摇匀,超声提取20min。取提取液约30mL转入离心管,在10000rpm离心机上离心5min。
3、净化
m滤膜,滤液用于液相色谱测定。m MCX柱活化和上样:分别用3ml甲醇,3ml水活化MCX柱,准确移取10mL离心液分次上柱。再用3ml水和3ml甲醇洗涤MCX柱,抽近干后用5%氨化甲醇溶液(4.5)3ml洗脱。洗脱液于氮吹仪上50℃氮吹至干,用2+8甲醇水定容,过0.45。
4、衍生化
L的BSTFA,混匀,在70℃衍生30min。同时用三聚氰胺标准系列做同步衍生。mL的吡啶和200m将6.2的净化液吹干,加入200。
三、测定
1、准备
柱子:DB-5MS柱
载气:He 流速: 1.3 ml/min 平均线性速度: 35 cm/sec 压力: 17.5 psi (initial)模式:恒流
进样:不分流或分流进样 (1:20),进样体积为1µl,进样温度: 250ºC
升温程序:起始温度为75ºC,持续1.0 min,以30ºC/min升温至300ºC,保持2.0min。传输线温度为280ºC。
运行时间: 10.5 min
质谱条件:质量范围: 40-450 amu
扫描模式:全扫描 (Electron Ionization)
溶剂延迟: 4.2 min (splitless); 3.8 min (split)
四极杆: 150ºC
离子源: 230ºC
监测离子:特征离子 171,99,73;分子离子:327,342
2、定性定量方法
定性方法:样品与标准品保留时间的相对标准偏差不大于0.5%。特征离子基峰百分数与标准品相差不大于20%。
定量方法:选择离子监测(SIM)法计算峰面积,单点或多点校准法定量。
四、结果结算和表述
按照下式计算试样中三聚氰胺的含量:
公式参数:
W-试样中三聚氰胺的含量,单位为毫克每公斤(mg/kg);
V-样品Z终定容体积,单位为克(g);
g/L);mc-由标准曲线而得的样液中三聚氰胺的含量,单位为微克每升(
m-试样量,单位为克(g)。
平行测定结果用算术平均值表示,结果保留三位有效数字。
五、允许差
取平行测定结果的算术平均值为测定结果,两个平行测定的相对偏差不大于20%。
上一篇: 液相色谱柱的分类和维护
下一篇: 液相色谱一次性针头过滤器