全国统一咨询订购热线:153-8757-7019

联系科捷

HOTLINE
全国统一免费服务热线

153-8757-7019

地址:南京光华路129-3号理工大学科技园A1楼2楼

电话:153-8757-7019

传真:025-83738955

E-mail:2021782209@qq.com

微信售后服务二维码

扫描科捷二维码
色谱仪行业应用当前位置:首页  ›› 色谱仪行业应用
高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法
作者:  浏览量:552  发布时间:2017-10-31 03:50:54

高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法

一、范围

高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法适用于猪的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏,鸡的肌肉、肝脏和肾脏组织中达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星药物残留量检测。


二、高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法

1、方法提要或原理

用磷酸盐缓冲溶液提取试料中的药物,C18柱净化,流动相洗脱。以磷酸—乙腈为流动相。用高效液相色谱—荧光检测法测定,外标法定量。


2、试剂和材料

5mol/L氢氧化钠溶液:取氢氧化钠饱和液14mL,加水稀释至50mL。

0.03mol/L氢氧化钠溶液:取5mol/L氢氧化钠溶液0.6 mL,加水稀释至100 mL。

0.05mol/L磷酸—三乙胺溶液:取浓磷酸3.4 mL,用水稀释至1000 mL。用三乙胺调节pH值至2.4(以配4L溶液为例,取浓磷酸3.4 mL×4=13.6 mL,加水使成4000 mL,用三乙胺调pH值至2.4)。

磷酸盐缓冲溶液(用于肌肉、脂肪组织):取磷酸二氢钾6.8g,加水使溶解并稀释至500 mL,用5mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。

磷酸盐溶液(用于肝脏、肾脏组织):取磷酸二氢钾6.8g,加水使溶解并稀释至500 mL,pH值为4.0~5.0。

标准储备液:分别取达氟沙星对照品约10mg,恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星对照品各约50mg,精密称定,用0.03mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释成浓度为0.2mg/mL(达氟沙星)和1 mg/mL(恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星)的标准工作液。置2℃~8℃冰箱中保存,有效期为1周。


3、对照品溶液稀释步骤

对照品储备液浓度:1 mg/mL

最大残留限量(100μg/kg→100ng/g)

上机浓度为0.05μg/kg:

1 mg/mL×1mL

50→20μg/mL

20μg/mL ×0.5mL

200→0.05μg/kg(此浓度对应最大残留限量浓度,因为20mL提取液只有5mL上柱)

阳性添加(100μg/kg→100ng/g   样品/2g→200ng/2g)

20μg/mL×0.5mL

10mL →1μg/mL

       1μg/mL×0.2mL            →200ng

注:甲磺酸达氟沙星(C19H20FN3O3▪CH4O3S):  C19H20FN3O3     =  357.39 =78.81%

                                       C19H20FN3O3▪CH4O3S    453.49

 

盐酸环丙沙星(C17H18FN3O3▪Hcl):  C17H18FN3O3     =  331.35   =   90.09%

                                 C17H18FN3O3▪Hcl       367.81


三、高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留测定步骤

1、试料的制备

绞碎后的供试样品、空白样品、空白添加试料样品


2、提取

取(2±0.05g)试料,置50mL离心管中,加磷酸盐缓冲溶液10.0mL,10000r/min匀浆1min。匀浆液转入离心管中,中速振荡5min,离心(肌肉、脂肪10000r/min5min;肝、肾15000r/min10min),取上清液,待用。用磷酸盐缓冲溶液10.0mL洗刀头及匀浆杯,转入离心管,洗残渣,混匀,中速振荡5min,离心(肌肉、脂肪10000r/min5min;肝、肾15000r/min10min)。合并两次上清液,混匀,备用。


3、净化

固相萃取柱先依次用甲醇、磷酸盐缓冲溶液各2mL预洗。取上清液5.0mL过柱,用水1mL淋洗,挤干。用流动相1.0mL洗脱,挤干,收集洗脱液。经滤膜过滤后作为试样溶液,供高效液相色谱法测定。


4、色谱条件

流动相:0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液—乙腈(82+18,v/v),使用前经微孔滤膜过滤;

流速:0.8mL/min;

检测波长:激发波长280nm;发射波长450nm;

进样量:20μL


四、测定方法灵敏度、准确度、精密度

1、灵敏度

达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星在鸡和猪的肌肉、脂肪、肝脏及肾脏组织中的检测限为20μg/kg,最大残留限量为100μg/kg。


2、准确度

本方法在20μg/kg~500μg/kg添加浓度的回收率为60%~100%。


3、精密度

本方法的批内变异系数≤15%,批间变异系数≤20%。


五、结论

综上所述,本文用到的高效液相色谱仪对动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法是高效、快速、便捷的测试方法,具有一定的使用价值。



推荐产品

在线QQ:2021782209  客服信箱:2021782209@qq.com 全国免费服务电话:153-8757-7019

版权所有copyright ©2016-2018 南京科捷分析仪器有限公司 http://http://www.kj17.com.cn/ 苏ICP备10007070号